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　　平板菌落計數法是將待測樣品經(jīng)適當稀釋之后，其中的微生物充分分散成單個(gè)細胞，取一定量的稀釋樣液接種到平板上，經(jīng)過(guò)培養，由每個(gè)單細胞生長(cháng)繁殖而形成肉眼可見(jiàn)的菌落，即一個(gè)單菌落應代表原樣品中的一個(gè)單細胞。統計菌落數，根據其稀釋倍數和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數。但是，由于待測樣品往往不易*分散成單個(gè)細胞，所以，長(cháng)成的一個(gè)單菌落也可來(lái)自樣品中的2～3或更多個(gè)細胞。因此平板菌落計數的結果往往偏低。為了清楚地闡述平板菌落計數的結果，現在已傾向使用菌落形成單位(colony-formingunits，cfu)而不以絕對菌落數來(lái)表示樣品的活菌含量。

　　平板菌落計數法樣品的處理和稀釋

　　1．操作方法：以無(wú)菌操作取檢樣25g（或25ml)，放于225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶?jì)龋ㄆ績(jì)阮A置適當數量的玻璃珠)或滅菌乳缽內，經(jīng)充分振搖或研磨制成1：10的均勻稀釋液。

　　固體檢樣在加入稀釋液后，最好置滅菌均質(zhì)器中以8000~10000r/min的速度處理1min，制成1：10的均勻稀釋液。

　　用1ml滅菌吸管吸取1：10稀釋液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內，振搖試管混合均勻，制成1：100的稀釋液。

　　另取1ml滅菌吸管，按上項操作順序，制10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次即換用1支1ml滅菌吸管。

　　2．無(wú)菌操作：操作中必須有“無(wú)菌操作”的概念，所用玻璃器皿必須是*滅菌的，不得殘留有細菌或抑菌物質(zhì)。所用剪刀、鑷子等器具也必須進(jìn)行消毒處理。樣品如果有包裝，應用75%乙醇在包裝開(kāi)口處擦拭后取樣。

　　操作應當在超凈工作臺或經(jīng)過(guò)消毒處理的無(wú)菌室進(jìn)行。瓊脂平板在工作臺暴露15分鐘，每個(gè)平板不得超過(guò)15個(gè)菌落。

　　3．采樣的代表性：如系固體樣品，取樣時(shí)不應集中一點(diǎn)，宜多采幾個(gè)部位。固體樣品必須經(jīng)過(guò)均質(zhì)或研磨，液體樣品須經(jīng)過(guò)振搖，以獲得均勻稀釋液。