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       不同體積培養基對抑菌圈大小有一定影響，抑菌圈會(huì )隨培養基體積的增加而變小，培養基體積15 mL時(shí)為佳值。試驗人員應注重量化培養基的量以減少試驗誤差。為了判斷這一結論的準確性，我們可以通過(guò)一下的試驗來(lái)進(jìn)行鑒定。本試驗正是通過(guò)制備不同體積的培養基來(lái)觀(guān)察其對抑菌圈的影響。
　　1.試驗儀器及材料
　　試驗儀器：二級生物安全柜，生化培養箱，高壓滅菌鍋，恒溫水平搖床，移液槍。
　　標準菌株：ATCC6538金黃色葡萄球菌，8099大腸桿菌。
　　試樣：1.5 cm×1.5 cm規格，滅菌處理。
　　平板計數瓊脂，PBS緩沖液。
　　2.試驗方法
　?。?）接種液準備：按照標準規定，用PBS緩沖液稀釋細菌懸液至1×106cfu/mL～5×106cfu/mL。
　?。?）培養基準備：分別用移液槍制備10 mL、15mL、20 mL、25 mL四個(gè)不同體積的培養基各6個(gè)（3個(gè)用于A(yíng)TCC6538金黃色葡萄球菌，另3個(gè)用于8099大腸桿菌）。
　?。?）試樣接種：用無(wú)菌棉拭子蘸取接種菌液，在平皿的培養基表面均勻涂抹3次，每涂抹1次，平皿轉動(dòng)60°，后將棉拭子繞平皿邊緣涂抹一周，蓋上蓋子，置室溫干燥5 min。
　?。?）貼試樣：將試樣平貼在培養基上，用無(wú)菌鑷子輕壓試樣，使其緊貼培養基表面。每個(gè)培養基貼一塊試樣于中間位置。
　?。?）培養：倒置平皿，放入生化培養箱中37℃培養16h～18 h。
　?。?）測量：測出每個(gè)平皿中的抑菌圈外沿總寬度及試樣總寬度，進(jìn)而算出抑菌圈寬度，求出平均值。
　　從試驗結果可看出，不同體積的培養基對抑菌圈的影響還是比較大的。培養基體積為10 mL和15 mL時(shí)，抑菌圈相差不大，但當培養基增加到20 mL時(shí)，抑菌圈驟降，下降率超過(guò)20%?？傮w來(lái)說(shuō)，隨著(zhù)培養基體積的增加，厚度也增高，但抑菌圈卻反而變小。原因可能是體積增大，越多的抗菌劑滲透到了培養基底層，從而影響了表面的抑菌圈大小。
　　3.結論
　　由以上試驗可以看出掌控培養基的體積是準確測量抑菌圈的一個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)。以15 mL為準，10mL~15mL都是合適的。培養基太少不能覆蓋平皿底部，多于15mL會(huì )使結果低于實(shí)際值而把不合格樣品誤判成合格品。因此，在試驗時(shí)，應準確量化培養基的量，可采用移液槍或量筒來(lái)定量，而不能光靠經(jīng)驗和感覺(jué)來(lái)定量培養基體積。