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企業(yè)動(dòng)態(tài)

不同培養基的體積對抑菌圈的影響大
更新時(shí)間:2018-12-11   點(diǎn)擊次數:2848次
       不同體積培養基對抑菌圈大小有一定影響,抑菌圈會(huì )隨培養基體積的增加而變小,培養基體積15 mL時(shí)為佳值。試驗人員應注重量化培養基的量以減少試驗誤差。為了判斷這一結論的準確性,我們可以通過(guò)一下的試驗來(lái)進(jìn)行鑒定。本試驗正是通過(guò)制備不同體積的培養基來(lái)觀(guān)察其對抑菌圈的影響。
  1.試驗儀器及材料
  試驗儀器:二級生物安全柜,生化培養箱,高壓滅菌鍋,恒溫水平搖床,移液槍。
  標準菌株:ATCC6538金黃色葡萄球菌,8099大腸桿菌。
  試樣:1.5 cm×1.5 cm規格,滅菌處理。
  平板計數瓊脂,PBS緩沖液。
  2.試驗方法
 ?。?)接種液準備:按照標準規定,用PBS緩沖液稀釋細菌懸液至1×106cfu/mL~5×106cfu/mL。
 ?。?)培養基準備:分別用移液槍制備10 mL、15mL、20 mL、25 mL四個(gè)不同體積的培養基各6個(gè)(3個(gè)用于A(yíng)TCC6538金黃色葡萄球菌,另3個(gè)用于8099大腸桿菌)。
 ?。?)試樣接種:用無(wú)菌棉拭子蘸取接種菌液,在平皿的培養基表面均勻涂抹3次,每涂抹1次,平皿轉動(dòng)60°,后將棉拭子繞平皿邊緣涂抹一周,蓋上蓋子,置室溫干燥5 min。
 ?。?)貼試樣:將試樣平貼在培養基上,用無(wú)菌鑷子輕壓試樣,使其緊貼培養基表面。每個(gè)培養基貼一塊試樣于中間位置。
 ?。?)培養:倒置平皿,放入生化培養箱中37℃培養16h~18 h。
 ?。?)測量:測出每個(gè)平皿中的抑菌圈外沿總寬度及試樣總寬度,進(jìn)而算出抑菌圈寬度,求出平均值。
  從試驗結果可看出,不同體積的培養基對抑菌圈的影響還是比較大的。培養基體積為10 mL和15 mL時(shí),抑菌圈相差不大,但當培養基增加到20 mL時(shí),抑菌圈驟降,下降率超過(guò)20%??傮w來(lái)說(shuō),隨著(zhù)培養基體積的增加,厚度也增高,但抑菌圈卻反而變小。原因可能是體積增大,越多的抗菌劑滲透到了培養基底層,從而影響了表面的抑菌圈大小。
  3.結論
  由以上試驗可以看出掌控培養基的體積是準確測量抑菌圈的一個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)。以15 mL為準,10mL~15mL都是合適的。培養基太少不能覆蓋平皿底部,多于15mL會(huì )使結果低于實(shí)際值而把不合格樣品誤判成合格品。因此,在試驗時(shí),應準確量化培養基的量,可采用移液槍或量筒來(lái)定量,而不能光靠經(jīng)驗和感覺(jué)來(lái)定量培養基體積。

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