紅細胞微核計數使用的方法步驟
更新時(shí)間:2023-05-12 文章更新于2023-05-12 點(diǎn)擊次數:846次
紅細胞微核計數(RedBloodCellMicronucleusTest,RBCMNTest)是一種常見(jiàn)的體外細胞毒性測試方法,用于評估化學(xué)物質(zhì)、藥物或其他化合物對人體血液系統的毒性效應。微核是由于DNA損傷而形成的小型胞核,通常發(fā)生在有絲分裂期間。正常情況下,當一次有絲分裂結束后,胞核會(huì )重新組合和分配到兩個(gè)新的細胞中;然而,當DNA損傷發(fā)生時(shí),細胞無(wú)法完成DNA修復并重新組合胞核。這時(shí),新細胞中就會(huì )形成一個(gè)或多個(gè)額外的小型胞核,即微核。因此,觀(guān)察微核數量變化可以比較敏感地反映DNA的損傷程度。
紅細胞微核計數方法步驟:
1.準備樣本:收集靜脈血,避免使用抗凝劑,并將樣本盡快送到實(shí)驗室進(jìn)行處理。
2.處理樣本:將血液加入適量的培養基,使其接觸到不同濃度的測試物質(zhì),通常為化學(xué)物質(zhì)或藥物。處理后,在不同時(shí)間點(diǎn)采集血標本。
3.制備細胞涂片:將血液沉淀在載玻片上,然后固定、染色并顯微鏡下觀(guān)察到底是否有微核。
4.計算微核數目:在顯微鏡下計算每個(gè)細胞的總個(gè)數和微核的數量。最終,計算出微核率(micronucleusfrequency,MNF)或微核指數(micronucleusindex,MNI)對測試物質(zhì)的毒性進(jìn)行評估。
優(yōu)點(diǎn):
1.反映DNA損傷敏感、準確程度高。
2.實(shí)驗操作簡(jiǎn)單、重復性好、成本低。
3.早期發(fā)現化學(xué)物質(zhì)、藥物或其他化合物的毒性效應,有效保護人類(lèi)健康。
紅細胞微核計數是一種常用的體外細胞毒性測試方法,可以準確反映DNA損傷程度,廣泛應用于化學(xué)物質(zhì)和藥物等對人類(lèi)健康的毒性評估。然而,該方法也存在一些缺點(diǎn)和局限性,需要在實(shí)際應用過(guò)程中認真分析和考慮。為了更好地保護人類(lèi)健康,需要不斷完善和改進(jìn)技術(shù),提高其靈敏度和可靠性。