內酰胺酶檢測方法主要包括這些,快來(lái)看看
更新時(shí)間:2024-03-15 文章更新于2024-03-15 點(diǎn)擊次數:1335次
β-內酰胺酶是金黃色葡萄球菌和淋球菌等多種細菌產(chǎn)生的一種抗生素滅活酶,能裂解青霉素和頭孢菌素等β-內酰胺類(lèi)抗生素的β-內酰胺環(huán),使其變成無(wú)抗菌活性的物質(zhì),從而表現為產(chǎn)酶細菌對這類(lèi)抗生素耐藥。由于β-內酰胺酶檢測速度快,所以檢測β-內酰胺酶與常規藥敏實(shí)驗相比,能更快地獲得結果。檢測β-內酰胺酶的方法有酸度法和碘測定法。
內酰胺酶檢測方法主要包括以下幾種:
1.紙片擴散法:將含有β-內酰胺類(lèi)抗生素的紙片放置在含有細菌的瓊脂平板上,通過(guò)觀(guān)察紙片周?chē)娜芙鈪^域大小和形狀,判斷細菌是否產(chǎn)生內酰胺酶。
2.酶活性測定法:通過(guò)檢測含有β-內酰胺類(lèi)抗生素的溶液中的內酰胺酶活性,判斷細菌是否產(chǎn)生內酰胺酶。
3.分子生物學(xué)檢測法:通過(guò)PCR技術(shù)擴增內酰胺酶基因,檢測細菌是否攜帶內酰胺酶基因。
在臨床應用中,紙片擴散法是常用的方法,因為其操作簡(jiǎn)單、成本低、結果明顯易讀。但是,該方法存在著(zhù)假陰性和假陽(yáng)性的問(wèn)題,需要結合臨床表現和病原學(xué)實(shí)驗結果進(jìn)行綜合分析。
酸測量法:青霉素被β-內酶胺酶水解后成青霉素酸,pH值下降到6.8以下,用酚紅指示劑,由紅(紫)色(原液:枸櫞酸緩沖液pH8.5)→黃色(pH6.8以下);淀粉-碘測定法:β內酰胺酶破壞β內酰胺環(huán),碘與被打開(kāi)β內酰胺環(huán)結合,使藍色的淀粉-碘復合物轉變成無(wú)色。β-內酰胺酶是多種不同類(lèi)型以β-內酰胺類(lèi)抗菌藥物為底物的降解酶,通過(guò)水解β-內酰胺環(huán)造成β-內酰胺類(lèi)藥物失去活性,將待測菌與頭孢硝噻吩作用一定時(shí)間后,如待測菌產(chǎn)生青霉素酶,則可水解頭孢硝噻吩的β-內酰胺環(huán),顏色由黃色變?yōu)榧t色。
總的來(lái)說(shuō),內酰胺酶檢測對于臨床合理用藥和預防細菌耐藥性的發(fā)生具有重要意義。臨床醫生需要根據檢測結果,結合患者的病情和藥物使用史,選擇合適的抗生素治療方案,減少藥物的濫用和耐藥性的發(fā)生。
上一篇 : 菌落計數儀常見(jiàn)故障排查及預防方法分享 下一篇 : 菌落計數方法在各個(gè)領(lǐng)域得到廣泛應用