平板菌落計數法是如何使用公式計算的？
更新時(shí)間：2024-03-15 文章更新于2024-03-15 點(diǎn)擊次數：5040次
平板菌落計數法，是種統計物品含菌數的有效方法。方法如下:將待測樣品經(jīng)適當稀釋之后,其中的微生物充分分散成單個(gè)細胞，取-定量的稀釋樣液涂布到平板上,經(jīng)過(guò)培養,每個(gè)單細胞生長(cháng)繁殖而形成肉眼可見(jiàn)的菌落,即一個(gè)單菌落應代表原樣品中的一一個(gè)單細胞;統計菌落數，根據其稀釋倍數和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數。
平板菌落計數法公式為每毫升中菌落形成單位(cfu)=同一稀釋度三次重復的平均菌落數×稀釋倍數×5。
一般選擇每個(gè)平板上長(cháng)有30~300個(gè)菌落的稀釋度計算每毫升的含菌量較為合適。同一稀釋度的三個(gè)重復對照的菌落數不應相差很大，否則表示試驗不精確。實(shí)際工作中同一稀釋度重復對照平板不能少于三個(gè)，這樣便于數據統計，減少誤差。由10-4、10-5、10-6三個(gè)稀釋度計算出的每毫升菌液中菌落形成單位數也不應相差太大。平板菌落計數法，所選擇倒平板的稀釋度是很重要的。一般以三個(gè)連續稀釋度中的二個(gè)稀釋度倒平板培養后所出現的平均菌落數在50個(gè)左右為好，否則要適當增加或減少稀釋度加以調整。
平板菌落計數法使用的培養基為結晶紫中性膽鹽瓊脂培養基，簡(jiǎn)稱(chēng)VRBA。無(wú)論是國標，還是培養基的使用說(shuō)明中都明確表示，VRBA是不需要進(jìn)行滅菌的，煮沸2min即可使用。特別指出這一點(diǎn)是因為很多朋友都在問(wèn)VRBA的滅菌條件，對不滅菌的培養基不信任，害怕出現檢測異常，那是因為這些小伙伴們對其中的原理不清楚。
大腸菌群的定義是在一定培養條件下能夠在發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌，因此大腸菌群是不能形成芽孢的，在VRBA培養基煮沸的過(guò)程中，即使有大腸菌群存在也會(huì )被殺滅，所以從培養基帶入污染的可能性是沒(méi)有的。當然盛裝培養基的容器是需要進(jìn)行滅菌的，以免容器引入污染。
另外，VRBA是一種選擇性的培養基，含有的結晶紫對革蘭氏陽(yáng)性菌有比較強的抑制作用而對革蘭氏陰性菌幾乎沒(méi)有作用，而且平板培養產(chǎn)生的菌落還需要進(jìn)行復發(fā)酵的驗證，因此VRBA培養基就不需要進(jìn)行滅菌了。但值得注意的是，VRBA需要現配現用，配制出的培養基應當在3h之內使用完畢。
