平板菌落計數法對于活菌檢測存在的重要意義
更新時(shí)間:2024-03-27 文章更新于2024-03-27 點(diǎn)擊次數:3751次
平板菌落計數法被廣泛應用于生物制品檢驗、食品以及飲料和水等的含菌指數或污染程度的檢測。這種方法主要是將待測樣品經(jīng)適當稀釋之后,其中的微生物充分分散成單個(gè)細胞,取一定量的稀釋樣液接種到平板上,經(jīng)過(guò)培養,由每個(gè)單細胞生長(cháng)繁殖而形成肉眼可見(jiàn)的菌落,即一個(gè)單菌落應代表原樣品中的一個(gè)單細胞。這種方法的優(yōu)勢在于可以獲得活菌的信息。
常用的有平板菌落計數法,是根據每個(gè)活的細菌能長(cháng)出一個(gè)菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋?zhuān)缓髮⒍康南♂屢哼M(jìn)行平板培養,根據培養出的菌落數,可算出培養物中的活菌數。此法靈敏度高,是一種檢測污染活菌數的方法,也是目前上許多國家所采用的方法。使用該法應注意:①一般選取菌落數在30~300之間的平板進(jìn)行計數,過(guò)多或過(guò)少均不準確;②為了防止菌落蔓延,影響計數,可在培養基中加入O.001%2,3,5一氯化三苯基四氮唑(TTC);③本法限用于形成菌落的微生物。
一般選擇每個(gè)平板上長(cháng)有30—300個(gè)菌落的稀釋度計算每毫升的含菌量較為合適。同一稀釋度的三個(gè)重復對照的菌落數不應相差很大,否則表示試驗不。實(shí)際工作中同一稀釋度重復對照平板不能少于三個(gè),這樣便于數據統計,減少誤差。由10-4、10-5、10-6三個(gè)稀釋度計算出的每毫升菌液中菌落形成單位數也不應相差太大。
平板菌落計數法,所選擇倒平板的稀釋度是很重要的。一般以三個(gè)連續稀釋度中的第二個(gè)稀釋度倒平板培養后所出現的平均菌落數在50個(gè)左右為好,否則要適當增加或減少稀釋度加以調整。